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黄曲霉毒素B1 ELISA试剂盒

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详细说明

    一、原理

本试剂盒采用固相酶联免疫吸附ELISA原理,通过黄曲霉毒素B1(AFB1)抗原和曲霉毒素B1(AFB1)抗体,待测抗原的竞争免疫反应,以及酶的催化显色反应来检测AFB1,优点是灵敏度高,特异性好,操作简便,结果易判读,适用于食品、饲料及相关原料中AFB1的定量检测。   

 

二、试剂盒技术指标

试剂盒灵敏度:0.1 ppb

回收率:  谷物/饲料中AFB1回收率   95%±15%

变异系数:批内变异系数<10%,批间变异系数<15%。

 

三、试 剂 盒 组 成

1.微量测试孔:  96T/8孔

2.标 准 液×6瓶:(1 mL/瓶) 0 ppb  0.05 ppb  0.15 ppb  0.45 ppb  1.35 ppb  4.05 ppb

3.抗体工作液                 7 mL

3.酶标记物                  12 mL

4.底物缓冲液                 7 mL  

5.底物液                    7 mL  

6.终止液                     7 mL

7.20倍浓缩洗涤液            50 mL   加蒸馏水后稀释到1000 mL。

 

四、样本前处理步骤

实验准备:配制60 %甲醇水溶液(v/v,60:40)和20 %甲醇水溶液(v/v,20:80)。

注意:请精确配制上述溶液,以免影响检测的准确性。

1 . 脂肪含量低的固体样品(如大米、玉米、小麦和饲料等)

1、称取5 g 粉碎样品于100 mL带塞三角瓶内,准确加入25 mL 60%甲醇水溶液。

2、将加入了甲醇水溶液的样品放入振荡器内(或用手强力振荡),充分振荡3 min后,用滤纸过滤,收集滤液。

3、取滤液2 mL,加入6 mL 20 %甲醇水溶液,混匀,用whatman 1号滤纸过滤,此为样品待检液。

2.酱油、醋

1、称取5 g样品于25 mL小烧杯中,用10 mL蒸馏水将试样转移到125 mL分液漏斗中,加入25 mL三氯甲烷,加塞轻轻振摇3 min,静置分层。

2、放出下层三氯甲烷层,取5 mL于20 mL蒸发皿中,65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后,准确加入5 mL 60%甲醇水溶液,将蒸发皿中的凝结物充分溶解。

3、取溶解液2 mL,加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,此为样品待检液。

3.食用油(如菜油、麻油、色拉油、花生油等)

1、称5 g油样于25 mL小烧杯中,用20 mL石油醚或正乙烷分次将试样转移至125 mL分液漏斗中,准确加入25 mL 60%甲醇水溶液溶液,加塞轻轻振摇5 min,静置分层,放出下层60%甲醇水提取液。

2、取提取液2 mL,再加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,此为样品待检液。

4.酒类

1、称取5 g样品于125 mL分液漏斗中,加入25 mL三氯甲烷,加塞轻轻振摇3 min,静置分层。

2、放出下层三氯甲烷层,取5 mL于20 mL蒸发皿中,65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后,准确加入5 mL 60%甲醇水溶液,将蒸发皿中的凝结物充分溶解。

3、取溶解液2 mL,再加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,此为样品待检液。

5.花生

1、样品去壳粉碎,称取5 g于100 mL具塞三角瓶中。加入25 mL 60%甲醇水溶液和20 mL正乙烷(或石油醚),振摇10 min,用whatman 1号滤纸过滤。

2、收集滤液于125 mL分液漏斗中,静置分层后放出下层60%甲醇水提取液。

3、取提取液2 mL,再加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,再用whatman 1号滤纸过滤,此为样品待检液。

6.月饼、桃酥、花生酱等

1、称取5 g粉碎样品于125 mL具塞三角瓶中,准确加入25 mL 60%甲醇水溶液和20 mL正乙烷(或石油醚)加塞震荡10 min,过滤,收集滤液于分液漏斗中,静置分层。

2、待下层甲醇水溶液澄清后,放出甲醇水溶液于另一三角瓶中。吸取10 mL甲醇水提取液于125 mL分液漏斗中,加入20 mL三氯甲烷,加塞轻轻振摇3 min,静置分层。放出下层三氯甲烷层,取10 mL于20 mL蒸发皿中,65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后,准确加入5 mL 60%甲醇水溶液,将蒸发皿中的凝结物充分溶解。

3、取溶解液2 mL,再加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,此为样品待检液。

7.面粉、饲料浓缩料

1、称取5 g样品于125 mL具塞三角瓶中,准确加入25 mL 60%甲醇水溶液加塞震荡10 min,过滤,收集滤液。

2、吸取10 mL滤液于125 mL分液漏斗中,加入20 mL三氯甲烷,加塞振摇3 min,静置分层。放出下层三氯甲烷层,取10 mL于20 mL蒸发皿中,65 ℃水浴通风挥干。挥干冷却后,准确加入5 mL 60%甲醇水溶液,将蒸发皿中的凝结物充分溶解。

3、取溶解液2 mL,再加入6 mL 20%甲醇水溶液,混匀,此为样品待检液。

 
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